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    3月11日，清華大學(xué)生命學(xué)院施一公研究組在《自然》雜志上在線發(fā)表科研論文，報道了大腸桿菌谷氨酸：γ-氨基丁酸（GABA）反向轉(zhuǎn)運蛋白（GadC）的晶體結(jié)構(gòu)，并結(jié)合生化實驗提出了GadC轉(zhuǎn)運底物的可能機制。

    2011年在歐洲暴發(fā)的腸溶血性大腸桿菌疫情導(dǎo)致數(shù)千人感染，多人死亡，并引起了極大的社會恐慌。大腸桿菌O104:H4菌株是這一疫情的罪魁禍首。食物來源的大腸桿菌必須通過極酸的胃環(huán)境才能到達腸道，為保證在如此低的pH下仍然能夠存活，大腸桿菌進化出了多個抗酸系統(tǒng)來對抗極酸環(huán)境。因此，研究大腸桿菌抗酸機制對人類健康有直接的重要意義。

    大腸桿菌抗酸系統(tǒng)Ⅱ（Acid Resistance system 2）通過谷氨酸：γ-氨基丁酸反向轉(zhuǎn)運蛋白（GadC）將細胞外的谷氨酸轉(zhuǎn)運到細胞內(nèi)，在胞漿內(nèi)谷氨酸發(fā)生脫羧反應(yīng)，消耗一個質(zhì)子生成γ-氨基丁酸，而產(chǎn)物γ-氨基丁酸再被GadC轉(zhuǎn)運到細胞外。整個過程相當于向細胞外排出一個質(zhì)子，降低了細胞內(nèi)的質(zhì)子濃度，從而起到了抗酸的作用。因此，理解GadC的工作機理對于研究腸道致病菌抗酸系統(tǒng)十分關(guān)鍵。

    從GadC的三維空間結(jié)構(gòu)信息入手，施一公研究組解析了大腸桿菌GadC高分辨率的晶體結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)分析表明，含有12個跨膜螺旋的GadC在pH堿性條件下呈現(xiàn)出轉(zhuǎn)運通道開口朝向胞內(nèi)的構(gòu)象。令人驚奇的是，GadC羧基端結(jié)構(gòu)域在細胞內(nèi)一側(cè)像塞子一樣將轉(zhuǎn)運通道封閉住。

    進一步的生化實驗表明，GadC對底物的轉(zhuǎn)運嚴格依賴于環(huán)境pH值：野生型GadC在pH小于6.5的環(huán)境下才具有轉(zhuǎn)運能力，而在pH大于6.5的環(huán)境中完全沒有活性。羧基端“塞子”結(jié)構(gòu)域在GadC感受pH的過程中起到了重要的調(diào)節(jié)作用。該機制既保證了抗酸系統(tǒng)在極酸環(huán)境中能夠啟動并轉(zhuǎn)運底物，又防止其在正常生理條件下造成胞內(nèi)質(zhì)子不必要的外流。

    以上研究成果為進一步研究大腸桿菌抗酸機制提供了重要線索。這也是該研究組繼2009年、2010年報道Arginine:Agmatine反向轉(zhuǎn)運蛋白AdiC的結(jié)構(gòu)與機理之后，在腸道細菌抗酸性研究中的又一重要成果。